Для выделения панцирей диатомей из донных осадков современных морей и озер используется иная методика.
При изучении донных отложений Северной Атлантики Ломан (Lohman, 1941) кипятил 2 г осадка в течение 30 мин. в 10%-й HCl. Последующая операция заключалась в декантации (повторных сливах) для удаления соляной кислоты и мелкого пелита. Основная задача при этом состояла в выборе интервалов между сливами, чтобы не удалить мелкие створки диатомей. Обычно для осадков Атлантики приходилось сливать не менее 4 раз с интервалом около 1 часа. Органические примеси удалялись кипячением в крепкой H2SO4 (до полного сгорания) с последующим добавлением натриевой селитры (NaNO3).
Морские и океанские современные осадки, бедные органическими веществами, не требуют обработки серной кислотой. Именно такой сокращенной методики придерживался Кольбе (Kolbe, 1954), когда впервые приступил к изучению диатомей в толще осадков Тихого океана. Он обрабатывал осадки разбавленной соляной кислотой, а затем осторожно проводил декантацию через строго определенные промежутки времени. Как Ломан, так и Кольбе не пользовались тяжелыми жидкостями для извлечения панцирей диатомей из осадков. Кольбе предусматривал возможность подсчета диатомей в натуральном осадке, справедливо считая, что всякое обогащение серьезно нарушает их естественное количественное и видовое соотношение. Он производил подсчет створок Coscinodiscus nodulifer в 1 г осадка в разных пробах из экваториальной зоны Тихого океана. Бралась навеска в 250 мг, высушивалась на воздухе, обрабатывалась затем 10-15%-й соляной кислотой и отмывалась до полного удаления кислоты. Отмытый осадок разбавлялся 50, 100 или 200 см3 дистиллированной воды для получения нужной суспензии (степень разбавления зависела от количества диатомей в осадке). Для диатомовых илов приходилось давать разбавление на 200 см3 (иначе было невозможно проводить подсчет створок). Для приготовления препарата бралось мерной пипеткой 0.2 см3 суспензии, предварительно сильно взболтанной, и заключалось обычным методом в смолу (стиракс или гиракс).
В Институте океанологии АН СССР, в отделе геологии океана, используется несколько отличная методика обработки донных осадков в целях изучения диатомей (Жузе и др., 1969). Сущность ее заключается в следующем.
Разрыхление осадка (диспергация, дезинтеграция) и очищение панцирей от загрязнений достигается путем его обработки двудецимолярным раствором триполифосфата натрия (Na5P3O10). Определенное количество осадка - обычно 1 г или 500 мг - помещают в термостойкий стакан объемом 100 см3, заливают триполифосфатом натрия так, чтобы осадок был покрыт раствором, и через час кипятят 15-20 мин., но не до полного выпаривания жидкости. Последующее кипячение происходит с добавлением в стаканчик 5-10 см3 30%-го пергидроля. Кипячение в пергидроле способствует лучшей диспергации осадка и очищению диатомей. Глинистые тонкие осадки в процессе кипячения с пергидролем обычно пенятся и могут вылиться из стакана. Осаждение пены достигается добавлением в стакан нескольких капель спирта.
Последующая обработка осадка зависит от того, будет ли препарат для исследования диатомей изготовлен из натурального осадка, без обогащения, или же после обогащения из легкой фракции осадка. Для обогащения суспензию натурального осадка пропускают через сито с отверстиями 0.1 мм для удаления крупного и среднего песка и через сито с отверстиями 0.05 мм для отделения крупного алеврита от мелкого. Мелкий алеврит очищают от пелита (частиц меньше 0.01 мм) отмучиванием. Из крупного и мелкого алеврита (отдельно) выделяют легкую фракцию с диатомеями с помощью тяжелой жидкости. В практике изучения диатомей в осадках современных морей и океанов предпочтительно готовятся препараты из натурального (необогащенного) осадка. Это дает возможность определить количество диатомей и их видовой состав, наиболее близкие к естественным.
Триполифосфат натрия удаляется дистиллированной водой путем многократных сливов через интервалы в 5-6 час. Отмывается триполифосфат также в центрифуге - 5-6-разовые сливы через 3 мин. Чистота отмывки проверяется универсальной индикаторной бумагой (рН 1-10). Чистый отмытый осадок разводится дистиллированной водой для образования суспензии, из которой приготовляется препарат. Степень разведения зависит от количества диатомей в осадке. Принятое разведение для диатомовых илов: 0.5 г осадка в 50-100-150 см3 воды. Если диатомей мало, осадок рекомендуют разводить в 25 см3 воды, чтобы концентрация диатомей в препарате была достаточной.
Для выделения диатомей из донных отложений со значительным терригенным разбавлением (например, из Каспийского моря) берут 5 г натурального осадка, кипятят в течение 30 мин. в 10%-м растворе пергидроля, затем разделяют осадок калиево-кадмиевой тяжелой жидкостью с удельным весом 2.6. Всплывшая легкая фракция ("кольцо") концентрирует в себе створки и панцири диатомей, имевшиеся в 5 г осадка (Жаковщикова, 1970, 1971).
Особая методика технической обработки донных осадков озер при-меняется при комплексном биологическом анализе, когда исследуются не только диатомеи, но и остатки других групп водорослей и водных животных (Кордэ, 19536).