Техника приготовления препарата

Для микроскопирования в оптическом микроскопе препарат из материала ископаемых и современных панцирей готовится одинаково. Употребляемые для препарата предметные стекла должны быть с ровно срезанными или со шлифованными краями, чтобы препарат лежал плотно на препаратоводителе и любую форму в препарате можно было бы найти повторно по отмеченным координатам препаратоводителя. Покровные стекла круглые или квадратные, 18x18 мм, толщина их не должна превышать 0.018-0.020 мм, так как фокусное расстояние иммерсионного объектива 90 равно 20 мкм. Предметные и покровные стекла перед употреблением необходимо обезжирить тщательным промыванием их мыльной горячей водой с последующим отмыванием дистиллированной водой или промыванием в чистом спирте. Чистые обезжиренные стекла сохраняют в плотно закрытой стеклянной посуде.

Для приготовления препарата берут каплю дистиллированной воды или чистого спирта с небольшой частью осадка, заключающего панцири диатомей, наносят каплю на покровное стекло, осторожно (чтобы не сломать панцири и створки) распределяют суспензию препаровальной иглой по всей поверхности покровного стекла и медленно подсушивают над слабым пламенем спиртовой или газовой горелки или над электроплиткой. На предметное стекло кладут кусочек среды и слабо подогревают, тщательно следя, чтобы среда только расплавилась, но не вскипала, иначе пузырьки воздуха в препарате будут помехой при микроскопировании и фотосъемке. Покровное стекло с осадком на нижней поверхности опускают на каплю подогретой среды и слегка придавливают, чтобы среда расплылась равномерно. Слой среды должен быть тонким. Избыток среды, выступивший за края покровного стекла, удаляют слабо подогретой препаровальной иглой или скальпелем. Приготовленный препарат следует быстро охладить, положив его на металлическую или толстую стеклянную пластинку, так как при медленном охлаждении в среде могут образоваться кристаллы, мешающие микроскопированию.

(Примечание. Если среды было взято недостаточно, надо ее добавить, положив у края покровного стекла и слегка подогрев предметное стекло; среда, расплавясь, проникает под покровное стекло. Не рекомендуется брать излишек среды, особенно когда предстоит учет количества диатомей в препарате, сделанном из определенного объема материала, потому что удаление излишков связано с потерей некоторого количества панцирей из препарата. В случае выпадения кристалликов среды во время длительного хранения препаратов их растворяют медленным нагреванием предметного стекла, пе доводя нагрева до вскипания среды.)

При всех манипуляциях приготовления препарата очень удобно держать покровное стекло зажатым пинцетом Корнэ, который можно ставить на стол, причем стекло всегда находится в горизонтальном положении.

Готовый препарат этикетируют. Этикетка должна быть точной копией этикетки пробы, ее наклеивают на одном конце предметного стекла, а на другом конце наклеивают порядковый номер препарата по журналу лаборатории. Этикетки можно заменить надписью на предметном стекле тушью, которую после высыхания следует покрыть бесцветным лаком. Несмываемую тушь^* лаком не покрывают.

^* (Способ приготовления несмываемой со стекла туши: 1 весовая часть глицерина смешивается с 1 весовой частью сбитого в пену яичного белка, добавляется равное им количество туши и медленно подогревается не до кипения. В готовую смесь прибавляют 1-2 капли карболовой кислоты.)

В работе с ископаемым материалом кроме препарата, приготовленного из обогащенной пробы, рекомендуется сделать контрольный препарат непосредственно из породы, особенно в тех случаях, когда в породе достаточно много остатков диатомей. Для этого берут кончиком скальпеля 1-2 мм³ породы в разных местах образца, чтобы получить среднюю пробу. Взятую породу стряхивают со скальпеля на покровное стекло, добавляют каплю перекиси водорода и подогревают для сжигания органических остатков. Материал тщательно разравнивают кончиком скальпеля или препаровальной иглы, удаляют крупные песчинки и заключают в среду. В контрольном препарате, приготовленном из диатомита, определяют процентное содержание створок диатомей и минеральных частиц с помощью сетчатого окуляра.

Для приготовления препарата из необогащенного материала донных осадков современных водоемов на покровное стекло, предварительно обезжиренное, наносится мерной пипеткой 0.1 см³ суспензии осадка, которая при этом взбалтывается. Если проба была разведена в 100 см³ воды (см. выше), то суспензия в 0.1 см³ соответствует 0.5 мг осадка, а при разведении пробы в 50 см³ воды - 1 мг осадка. Препарат подсушивается при комнатной температуре и заключается в смолу с высоким показателем преломления. Подсчет количества диатомей обычно производится в 5-8 горизонтальных рядах препарата с последующим пересчетом на весь препарат. Среднее число диатомей в 1 ряду препарата умножается на 120, т. е. на количество горизонтальных рядов на покровном стекле 18 x 18 мм при иммерсионном объективе 90 и окуляре 7, или на 80, если используется объектив 60. Таким образом определяется количество створок диатомей в одном препарате, или в 0.5 мг осадка.

При дальнейшем пересчете получаем данные количественного содержания створок диатомей в 1 г осадка. Пересчет производится следующим образом. Предположим, что среднее количество створок диатомей в 1 ряду препарата равно 37, тогда во всем препарате, или в 0.5 мг осадка, количество створок будет 37 x 120 = 4400. Для пересчета на 1 г осадка надо 4400 x 2000=8 800 000. Следовательно, в 1 г осадка будет 8 800 000 створок или 4 400 000 панцирей диатомей. Параллельно под- считываются створки каждого вида в препарате, что можно выразить на диаграммах в абсолютных числах или в процентах от общего количества створок других видов. В том же препарате одновременно можно подсчитать скелеты радиолярий и силикофлагеллат, иглы губок.

В препарате из цельного осадка диатомеи находятся между собой в со-отношениях, наиболее отвечающих природным. Однако при такой методике приготовления препаратов практически не достигается обогащения и возможны потери некоторых редко встречающихся видов. Сравнение препаратов, приготовленных из отдельных фракций осадка, с препаратами из натурального осадка показывает, что в последнем иногда совсем отсутствуют некоторые виды с единичной или редкой встречаемостью.

В препарате из натурального необогащенного осадка определяется с достаточной точностью общее содержание диатомей в 0.5 или 1 г осадка, а также количество каждого вида в отдельности. Не менее важно, что в таком препарате не происходит искусственной концентрации некоторых видов диатомей, как это происходит в отдельных его фракциях. Практика показала, что в препаратах из мелкоалевритовой фракции осадка искусственно повышается количество створок, близких по размерам к частицам этой фракции, т. е. от 50 до 10 мкм, а в крупноалевритовой фракции концентрируются створки диатомей больших размеров, от 100 до 50 мкм. Несомненно, что наибольшее число диатомей попадает в мелкоалевритовую фракцию осадка (0.05-0.01 мм), близкую по размерам частиц к средним размерам створок диатомей. Наиболее существенным недостатком препаратов из отдельных фракций осадка является отсутствие среди них фракции меньше 0.01 мм, которая не сохраняется и сливается при водном механическом анализе, а вместе с нею нередко исчезают легкие или мелкие створки (меньше 10 мкм), а также их обломки. Пренебрегать пелитовой фракцией осадка в особенности из озерных отложений нежелательно, хотя ее присутствие в препаратах чрезвычайно засоряет створки диатомей и вызывает затруднения при их определении и фотографировании.